Quando usado na culinária, as diferenças de sabor entre o óleo de trufa branca e preta são extremamente sutis. Portanto, o óleo de trufa branca e preta pode ser usado alternadamente. O sabor e aroma intensos do óleo de trufas são criados pelo uso de compostos químicos que imitam os encontrados em trufas reais. O óleo de trufas geralmente é produzido pela combinação de um gás aromático conhecido como 2,4-ditiapentano com azeite de oliva ou óleo de girassol.
Existem algumas diferenças de sabor entre as verdadeiras trufas pretas e brancas, retiradas do solo. As trufas pretas têm um sabor terroso e aroma pungente, enquanto as trufas brancas têm um aroma almiscarado com um sabor que tem notas de alho e chalotas. Como as trufas frescas são caras e raros, o óleo de trufas é usado como um substituto em muitos pratos. Produtos químicos artificiais como o 2,4-ditiapentano reproduzem os gases naturais produzidos pelas trufas reais. Algumas pessoas não gostam da natureza artificial do óleo comercial de trufas e observam que as trufas naturais produzem até 30 gases diferentes, uma complexidade de aromas que é difícil de duplicar sinteticamente.
O óleo de trufas é normalmente aplicado na comida antes de servir. Bastam algumas gotas para realçar o sabor dos pratos. Embora alguns óleos de trufas contenham pedaços de trufas secas, eles geralmente não contribuem para o sabor do óleo.