A glicólise, o primeiro processo na respiração celular, produz quatro ATP, mas usa duas das moléculas de ATP, produzindo, portanto, uma rede de duas moléculas de ATP. O processo também produz duas moléculas de NADH.
A glicólise começa com a glicose e a quebra em duas moléculas de fosfogliceraldeído. Este processo utiliza duas moléculas de ATP para energia. Em seguida, as moléculas de fosfogliceraldeído são convertidas em duas moléculas de piruvato, que também produz quatro moléculas de ATP. No entanto, uma vez que a primeira etapa da glicólise utiliza duas moléculas de ATP, a produção líquida de ATP a partir da glicólise é de apenas duas moléculas. Assim que o processo de glicólise estiver completo, o piruvato pode ser oxidado e colocado no ciclo de Krebs (o próximo processo na respiração celular) para criar ainda mais ATP e outros compostos de alta energia.