Os itens cobertos por uma chave dicotômica incluem se as bactérias são Gram positivas ou negativas, catalase positiva ou negativa, têm enzimas nitrato e contêm a enzima coagulase. A chave é um conjunto de perguntas que, quando completas, ajudam a identificar a bactéria. Cada questão requer a conclusão de um determinado teste.
O teste Gram-positivo ou Gram-negativo determina se bactérias estão presentes na amostra. O material é tingido e colocado ao microscópio para estudo. Uma coloração de Gram negativa geralmente aparece em rosa e indica que nenhum organismo foi encontrado. As colorações de Gram positivas geralmente são roxas e costumam ter mais estruturas na lâmina.
O teste de catalase é usado para identificar estafilococos, uma leitura positiva, ou estreptococos, uma leitura negativa. As bactérias catalase-positivas ingerem oxigênio, enquanto as bactérias catalase-negativas geralmente são anaeróbias.
O teste da nitrato redutase determina se uma bactéria produz uma de duas enzimas, nitrato redutase ou nitrito redutase. O material é cultivado em meio de cultura contendo nitrato de potássio. Se o meio de cultivo ficar vermelho e bolhas aparecerem em um tubo Durham conectado, o nitrogênio está presente.
O teste de coagulase determina se a bactéria contém coagulase, uma enzima de coagulação do sangue. O teste é realizado com soro sanguíneo claro. Se a enzima estiver presente, o soro fica turvo e espesso.
