Os substratos básicos da tripsina são as proteínas alimentares, de acordo com a Worthington Biochemical Corporation. A tripsina é uma enzima digestiva secretada pelo pâncreas. A tripsina separa grandes proteínas de alimentos em suas ligações peptídicas, quebrando-as em cadeias polipeptídicas menores.
Durante a digestão, a tripsina é secretada na seção duodenal do intestino delgado através do ducto pancreático. De acordo com o RSCB Protein Data Bank, a tripsina atua principalmente ao lado dos aminoácidos lisina e arginina em grandes cadeias de proteínas. Ao longo do processo digestivo, esses segmentos de proteína cortados são posteriormente acionados por enzimas digestivas adicionais, produzindo, em última instância, aminoácidos individuais. Esses pequenos aminoácidos são absorvidos pelo revestimento do intestino delgado e para a corrente sanguínea.