Mapeamento de restrição é o processo de obtenção de informações estruturais em um pedaço de DNA pelo uso de enzimas de restrição. É usado para mapear um segmento desconhecido de DNA quebrando-o em pedaços e identificando os locais dos pontos de interrupção.
Este método se baseia no uso de proteínas chamadas enzimas de restrição, que podem cortar ou digerir moléculas de DNA em sequências curtas e específicas chamadas de sítios de restrição. Depois que um segmento de DNA foi digerido usando uma enzima de restrição, os fragmentos resultantes podem ser examinados usando um método de laboratório chamado eletroforese em gel. Isso é usado para separar pedaços de DNA de acordo com seu tamanho.