Em microbiologia, uma cultura pura é uma cultura de laboratório que contém uma única espécie de organismo, de acordo com a Encyclopædia Britannica. Uma cultura pura geralmente é derivada de uma cultura mista.
Uma cultura mista é uma cultura que contém muitas espécies. A cultura pura é derivada da cultura mista pela transferência de uma pequena amostra para um novo meio de crescimento estéril de uma maneira que dispersa as células individuais pela superfície do meio. Também pode ser obtido diluindo o coletor de amostra antes de inocular o novo meio. Ambos os métodos separam as células individuais de forma que, quando as células se multiplicam, cada célula forme uma colônia distinta. As células podem então ser usadas para inocular mais meios com a garantia de que apenas um tipo de organismo está presente.