tRNA interpreta a sequência de nucleotídeos do mRNA para construir a sequência de aminoácidos correspondente. tRNA lê códons de mRNA para construir proteínas. tRNA faz seu trabalho depois que o mRNA está pronto para tradução.
O mRNA é feito de cadeias de códons, que são conjuntos de três nucleotídeos que codificam um único tipo de aminoácido. O objetivo do tRNA é ler esses conjuntos de três e traduzir essa informação para produzir o aminoácido correto. O tRNA está ligado aos códons pelos ribossomos, uma vez que cada códon de aminoácido tem um trio específico de nucleotídeos. O ribossomo encontra o códon inicial, AUG, e então o tRNA correto é produzido. O tRNA produz o aminoácido e é então descartado, mas o aminoácido fica para trás. O aminoácido se liga ao próximo na cadeia, que então se liga ao próximo e assim por diante. Esta cadeia de aminoácidos constrói uma proteína.
Esse processo continua até que o ribossomo encontre um dos códons de parada, como UGA, e o ribossomo então se separa do mRNA e termina a proteína. Normalmente existem vários ribossomos e grupos de tRNA trabalhando na mesma fita de mRNA para produzir proteínas.