O enxofre é um mineral essencial, pois a maioria das proteínas encontradas no corpo contém enxofre. Também faz parte dos fluidos corporais, gorduras e minerais que constituem o esqueleto. Algumas bactérias precisam de enxofre, na forma de sulfeto de hidrogênio, para realizar a fotossíntese.
Outra função do enxofre é evitar a fermentação quando é adicionado ao melaço na forma de dióxido de enxofre. Também é adicionado como conservante para vinho e foi usado como fumigante até o final do ano
século 19. O enxofre também é usado para fazer ácido sulfúrico e o enxofre residual das refinarias pode ser transformado em plástico. Este plástico é usado, entre outras coisas, em baterias de lítio-enxofre.
O enxofre também é usado para fazer fertilizantes e é um ingrediente da pólvora negra junto com o nitrato de carbono e potássio. É usado para vulcanizar borracha para torná-la mais resistente. O enxofre na forma de dimetilsulfóxido, ou DMSO, é usado para tratar infecções da bexiga e para aliviar a dor. O teor de enxofre em alguns banhos de lama é usado para tratar doenças de pele como acne, eczema, psoríase e verrugas. O enxofre também é usado para aliviar a dor da artrite. Alguns estudos descobriram que o DMSO também é útil para aliviar o desconforto das telhas.