Durante a interfase, a célula está se preparando para se dividir e sintetizando ativamente os componentes necessários. Originalmente e imprecisamente chamada de "estágio de repouso", a interfase é, na verdade, um período em que um grau considerável de atividade está ocorrendo no nível subcelular e molecular. Antes da divisão, a célula deve primeiro fabricar os materiais necessários e duplicar seus cromossomos, que são atividades que representam a função primária do estágio de interfase.
A interfase é dividida em três subdivisões: G1 (lacuna um), S (síntese) e G2 (lacuna dois). Durante o G1, a célula fabrica uma variedade de proteínas que são necessárias para a replicação do DNA. Os cromossomos são então replicados durante o estágio S. Cada cromossomo replicado consiste em duas cromátides irmãs, dobrando assim efetivamente o DNA da célula. A contagem de cromossomos, ou ploidia, no entanto, permanece a mesma. Na fase G2 seguinte, a célula fabrica as proteínas e estruturas que serão necessárias para a próxima divisão. Esse processo de divisão é chamado de mitose ou, se houver reprodução sexuada, meiose.
A quantidade de tempo que uma célula passa em interfase e suas subdivisões depende da espécie de organismo e do tipo de célula. A duração do estágio de interfase para a maioria dos mamíferos adultos é de cerca de 20 horas e representa cerca de 90 por cento do tempo gasto durante a divisão celular.