Espaço periplasmático é a área encontrada entre dois limites permeáveis. Espaço periplasmático é encontrado em bactérias Gram-negativas, entre as membranas interna e externa, de acordo com UniProt. Em bactérias Gram-positivas, o espaço periplasmático é menor e encontrado entre a camada externa do polímero e a membrana interna.
O periplasma contém proteínas e água e pode ser comparado ao citoplasma. No entanto, pequenas moléculas presentes no periplasma são diferentes do citoplasma, pois as membranas impedem que as trocas livres ocorram entre os dois compartimentos. As proteínas presentes no periplasma são muito diferentes do citoplasma e são guiadas durante a tradução por sinais específicos. As enzimas periplasmáticas desempenham papéis na motilidade, degradação de outros compostos e transporte.