Tanto em eucariotos quanto em procariotos, a glicólise ocorre no citoplasma da célula. A glicólise é a primeira etapa da respiração celular, que tem 10 etapas ao todo.
A glicólise é o primeiro estágio do metabolismo celular, quebrando a glicose em piruvatos. Os piruvatos são então capazes de metabolizar ainda mais por meio de fermentação ou respiração aeróbica. Como a glicólise não requer oxigênio, ela pode ocorrer tanto em organismos aeróbios quanto em anaeróbios. Esse processo envolve 10 etapas e também ocorre nas células vegetais, nas células dos microrganismos e nas células animais. Para as bactérias, esse processo é a única fonte de energia. Os demais processos de respiração celular são realizados na mitocôndria.