Uma biblioteca genômica é uma coleção de exemplos de cada sequência de DNA encontrada em um genoma específico, também conhecido como informação hereditária de um organismo. Uma biblioteca genômica contém uma grande coleção de colônias brancas.
Uma biblioteca genômica pode ser usada como um recurso para isolar colônias que contenham quaisquer genes de um organismo. Para começar a criar uma biblioteca genômica, uma amostra de DNA é extraída das células de um organismo. O DNA é então cortado no tamanho do gene usando pelo menos uma enzima de restrição. Um plasmídeo de clonagem é então cortado usando a mesma enzima de restrição usada para cortar o DNA.