As colunas C18 são usadas em cromatografia líquida de alto desempenho, ou HPLC, para separar componentes de uma mistura de produtos químicos solúveis por suas diferenças de polaridade. As colunas C18 têm cadeias de 18 carbonos presas a contas de sílica na parede da coluna.
As colunas C18 são usadas na cromatografia de fase reversa, em que o ambiente da coluna é apolar e a fase móvel (o líquido em que os produtos químicos são dissolvidos) é polar. C18 é a coluna de fase reversa mais comumente usada e a cromatografia de fase reversa é a técnica de HPLC mais comumente usada. Outros tipos comuns de colunas de fase reversa são C8, fenil e sílica pura sem nenhum outro grupo químico anexado.