O assentamento Jamestown na atual Virgínia foi o primeiro assentamento sob a carta concedida à Virginia Company pelo Rei James I. Os colonos da Virginia Company fizeram terras na Ilha Jamestown em 14 de maio de 1607. O assentamento cresceu e eventualmente realizou a primeira assembléia representativa inglesa na América do Norte.
O Capitão Bartholomew Gosnold liderou os colonos para construir uma colônia na Ilha Jamestown porque estava em uma posição onde os navios espanhóis seriam incapazes de atacar facilmente; no entanto, os índios atacaram o assentamento poucos dias após o desembarque. Depois de sobreviver ao ataque, as pessoas começaram a construir um forte rudimentar.
Em 1609, o forte sofreu uma explosão de pólvora, que feriu o Capitão John Smith, o homem encarregado de ajudar a abastecer o assentamento com produtos da Inglaterra. O assentamento mal sobreviveu ao inverno seguinte devido à falta de suprimentos, ataques aos índios e ao clima adverso; apenas 60 colonos sobreviveram até a primavera de 1610. Em junho, um navio da Inglaterra finalmente chegou, trazendo suprimentos novos e um novo governador, Lord De La Warr.
Além disso, a colônia era conhecida por ser associada com o nativo americano Pocahontas e seu pai, o chefe Powhatan. Ela se casou com o fazendeiro de tabaco John Rolfe em 1614.