Um colorímetro funciona iluminando a amostra e medindo a quantidade de luz que sai; esta figura é então comparada a uma quantidade de controle padrão. Um reagente conhecido é introduzido na amostra e a cor que se desenvolve como resultado do reagente é usada para determinar a transmissão de luz da amostra.
O colorímetro mede a transmissão de luz em unidades de absorbância ou porcentagem de transmissão. Os colorímetros seguem a Lei de Beer para fornecer as unidades de absorbância. A Lei de Beer é uma equação química usada para medir a absorção de uma amostra, observando a quantidade de luz que entra e sai, a absortividade e a curvatura do recipiente da amostra.