O objetivo de espalhar bactérias para isolamento é criar uma região na qual as bactérias são tão diluídas que, quando cada bactéria toca a superfície do ágar, fica longe o suficiente de outras células para que uma colônia isolada possa desenvolver. Isso permite o isolamento de vários organismos.
Os dois padrões de sequência mais comuns são a sequência T de três setores e a sequência de quadrantes de quatro setores. Os organismos são eliminados através do primeiro setor usando uma alça descartável ou agulha, ou uma alça reutilizável, geralmente com nicrômio ou fio de platina, e então passadas por um bico de Bunsen para esterilização.
Após o resfriamento, o loop é arrastado pelo setor inicial e transportado para o segundo setor para eliminar e diluir as bactérias. Este processo é continuado através do terceiro e quarto quadrante na placa de quatro setores.
Bactérias que crescem em temperaturas moderadas, chamadas de "bactérias mesófilas", normalmente são cultivadas em meio que é solidificado com 1,5 por cento de ágar ou agarose em uma placa de Petri estéril. As bactérias que preferem temperaturas mais altas, incluindo termófilos e hipertermófilos, também podem ser semeadas em meios de crescimento solidificados com substitutos de ágar, como Gelrite e goma de guar. Certifique-se de que as placas de Petri estão devidamente rotuladas para evitar confusão.
