A enzima DNA polimerase III é a principal enzima envolvida na replicação do DNA bacteriano. Ela executa a função da polimerase 5'-3 ', o que significa que adiciona nucleotídeos à extremidade 3' da formação Fita de DNA durante a replicação.
Antes que a replicação possa começar, a enzima helicase desenrola as duas fitas de DNA. Ambas as fitas tornam-se modelos para replicação. A DNA polimerase III não pode adicionar nucleotídeos livres a essas fitas até que os primers tenham sido adicionados pela enzima primase. Há também uma DNA polimerase I que revisa as fitas de DNA recém-sintetizadas para garantir que os nucleotídeos apropriados foram adicionados. Ele corrige erros quando eles são encontrados removendo o nucleotídeo ruim e adicionando o correto.