As tartarugas deslizantes de orelhas vermelhas exibem um elaborado comportamento de cortejo debaixo d'água e, se a fêmea não estiver interessada, ela se torna agressiva. Se ela está disposta a acasalar, ela vai para o fundo. O acasalamento leva apenas cerca de 10 minutos após um namoro de 45 minutos.
Os sliders de orelhas vermelhas geralmente atingem a maturidade sexual quando têm cerca de três a quatro anos de idade, embora a capacidade de acasalar dependa mais de seu tamanho do que de sua idade. Os machos são sexualmente maduros quando têm cerca de dez centímetros de comprimento, enquanto as fêmeas atingem de quinze a dezoito centímetros de comprimento quando atingem a maturidade sexual. Os machos têm garras mais longas do que as fêmeas, que usam durante o namoro e o acasalamento. Quando um homem corteja uma mulher, ele a circunda e vibra com as garras ao redor de sua cabeça. Embora as tartarugas sexualmente imaturas possam imitar esse comportamento, elas não acasalam depois.
A fêmea ajusta sua dieta e passa mais tempo ao sol após o acasalamento. A postura ocorre em dias ou semanas, e os ovos são fertilizados quando a fêmea os põe. No entanto, se a postura de ovos não ocorrer até a estação seguinte, o esperma do macho permanece viável dentro da fêmea. Pouco antes de colocar seus ovos, a fêmea encontra um local adequado e cava um buraco, geralmente perto da margem de um corpo de água. Ela pode botar de cinco a seis ninhadas por ano, e cada ninhada contém de dois a 30 ovos. O tempo de incubação depende da temperatura, mas varia de 59 a 112 dias.
