A Declaração de Independência foi assinada por 56 pessoas. Embora John Hancock, o presidente do Congresso Continental, tenha assinado o documento em 4 de julho de 1776, a maioria dos delegados provavelmente adicionou suas assinaturas em agosto . 2, 1776. O último signatário adicionou seu nome em 4 de novembro de 1776.
A assinatura da Declaração de Independência foi um gesto simbólico, uma vez que já tinha sido oficializada por votação no Congresso. A assinatura de John Hancock não foi apenas a primeira, mas também a maior. Era tão icônico que seu nome se tornou sinônimo da palavra "assinatura". Os historiadores discordam sobre se a maioria dos delegados assinou em 4 de julho ou 2 de agosto. No entanto, alguns delegados devem ter assinado depois de 4 de julho porque se juntaram ao Congresso após a adoção do documento em 4 de julho. A última pessoa a assinar foi Matthew Thornton, de New Hampshire, que ingressou no Congresso Continental em novembro de 1776 e assinou no canto inferior direito do documento. O signatário mais jovem foi Edward Rutledge, aos 26 anos, e o mais velho, Benjamin Franklin, aos 70 anos.
Nem todos os delegados ao Segundo Congresso Continental assinaram a Declaração de Independência. Alguns votaram contra, enquanto outros estavam ausentes quando o documento foi assinado. A primeira versão enviada aos estados não incluiu todas as 56 assinaturas, mas em 18 de janeiro de 1777, o Congresso determinou que outra versão que incluía as assinaturas fosse distribuída aos 13 estados.