O teste de fermentação de manitol é usado para testar se um micróbio pode fermentar o carboidrato manitol como fonte de carbono. Se manitol foi usado pelo micróbio, subprodutos ácidos serão produzidos e o pH do o meio no qual o micróbio fica cairá.
O manitol também é conhecido como manita, açúcar maná e osmitrol. É um sólido cristalino branco que parece e tem gosto de açúcar. Seu nome é derivado de sua semelhança com o maná alimentar bíblico. Sua fórmula molecular é C6H14O6. No teste de fermentação de manitol, um micróbio é frequentemente cultivado em placas de ágar sal de manitol (MSA), que contêm manitol e sal. Nesses lugares, a maioria dos micróbios não consegue crescer, a menos que consiga metabolizar o manitol.