Humanos e tigres são os principais inimigos dos lobos cinzentos. Embora os lobos frequentemente encontrem oposição de presas ou de outros animais que procuram roubar sua presa, apenas humanos e tigres procuram lobos próximos com a intenção de matar .
Os lobos são frequentemente interpretados erroneamente como criaturas perigosas e sanguinárias, o que levou à sua erradicação generalizada à medida que a humanidade se expandia pelo Velho e Novo Mundos. As pessoas temiam que os lobos cinzentos comessem seus rebanhos ou fizessem mal a suas famílias. Existem muito poucos registros de lobos ferindo humanos. Os lobos preferem ficar para si mesmos e seus territórios, comendo grandes animais com cascos e pequenos mamíferos, como alces e coelhos, na natureza, em vez de gado perto dos humanos. Os lobos cinzentos afugentam outros animais predadores que tentam roubar suas matanças ou competir com eles quando a comida é escassa.
