O rio Ohio corre na direção noroeste saindo da Pensilvânia de Pittsburgh, e depois para sudoeste até se juntar ao rio Mississippi em Illinois. O rio é formado pelos rios Allegheny e Monongahela. Mais água dela alimenta o rio Mississippi do que qualquer outro corpo de água.
Illinois, Indiana, Kentucky, Ohio, Pensilvânia e West Virginia estão todos ligados ao rio. Existem 20 represas ao longo do rio e fornecem água potável para mais de 3 milhões de pessoas.
O rio Ohio também desempenhou um papel importante na história. O Meadowcroft Rockshelter é a residência humana mais antiga conhecida, datando de 16.000 anos e localizada em um dos afluentes do rio.
